一体式超声波破碎仪用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎，同时可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的制备、分散及加速化学反应等。该设备被广泛用于生物学、微生物学、物理学、动物学、农学、制药、化工、污水处理、纳米材料等领域,也可用于产生波提取、超声波材料制备、超声波萃取、超声波乳化等。
破碎大肠杆菌用于提取表达外源蛋白，在使用一体式超声波破碎仪之前，用PBS悬浮，然后再破碎效果较好，其作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。
细菌沉淀直接加样品1 buffer，再加5μl的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤：
将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min就可以。在表达重组蛋白后用超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不*，而蛋白就在这些未破碎的细胞中。
相关问题探讨：
1.试验中产生气泡：因为探头位置没放好。超声波破碎仪探头一定要接近底部约1cm。功率根据仪器不同会有所不同，但可通过观察液面，有波动但不要太剧烈就好。
2.破3s停10s，破碎20-30个循环观察效果。
3.探头位置摆放要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可从菌浓度方面考虑。在使用超声波破碎时试着加大体积,振幅最好不要超过60%。
4.尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，通常方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，可停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。如果换用一体式超声波破碎仪来进行工作，由于热耗较小，停顿周期可适当减小。
地址：昆山市千灯镇千石商业中心3栋150号
邮箱：guotongzhang@qq.com
