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非接触破碎仪实验时遇到的常见问题说明

发布时间:2021-02-05浏览:99次
   非接触破碎仪的用途非常广泛,可安全地处理一定体积范围内的多种有机和无机物质。典型应用包括样品制备、细胞裂解、分解、均化、颗粒缩径、土壤测试以及加快化学反应。
  探头振动形成数百万个微气泡(空穴),微气泡不断膨胀并发生剧烈爆破。这种称为空穴现象的现象可以在探头尖部产生强力的剪切作用,从而引起液体中分子强烈振动。
  非接触破碎仪超声探头由钛合金制成,可以作为一个机械变量器来提高由转换器所产生的振动的振幅。探头直径越大,可以处理的样品量则越多,但是超声波强度会相应降低。当处理体积更多,粘度更大的样品,或在高压条件下工作时,需要使用更大功率的破碎仪。当处理含有机溶剂的样品或低表面张力的液体时,通常使用一体式探头,不建议使用探头尖可更换的探头。所有探头均可进行高温高压灭菌。
  非接触破碎仪试验时的常见疑问解析:
  链霉菌超声破碎的方法条件是什么?
  一般前处理就是配置成一定浓度的菌悬液,使用非接触破碎仪进行超声破碎。这时采用的具体条件如下:
  1.取细菌的24 h培养液于5 000 r/min下离心5 min收集菌体;
  2.用pH 7.5的Na2HPO-NaH2PO缓冲液洗涤3次,再用该缓冲液将菌体配成1:3的菌悬液.置于40 mL大塑料试管内;
  3.将大塑料试管置于冰浴中,采用超声波破碎(功率200 W,1/2”探头,破碎30 s,间歇30 s);
  4.破碎液于12 000 r/min下高速冷冻离心30 min,收集细胞碎片和上清液,超声破菌流程与上述基本一致,就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris-HCl,洗涤一次就可以。另外超声剂量随样品量、菌体改变比较大,功率可以到400-600w,超5s,停5s,冰浴,要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数,有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的(G+C)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌分枝类群。在做大肠杆菌超声时,采用的是400W非接触破碎仪,超5停5的方法效果不错,但是用在链霉菌上似乎没什么效果,这是因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。
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